أجرى فريق بحثى يضم كلا من الدكتورحسام عبد المقصود -البنك القومي للجينات،والدكتورمحمد غازي البربري،والدكتورة رحاب نبيل مصطفي الباحثان بقسم بحوث الزيتون وفاكهة المناطق الجافة وشبة الجافة بمعهد بحوث البساتين، دراسة لتحسين تقنية التطعيم المجهري لزيتون الكالاماتا وتقييم دقتها الوراثية.
استهدفت الدراسة تطوير بروتوكول شامل للتطعيم المجهري في المختبر لزيتون كالاماتا لتعزيز بقاء الشتلات وضمان سلامة اتحادات الطعوم.
واستخدم البحث منهجيات لتحسين إكثار الزيتون من خلال قضايا حيوية مثل التوافق بين الأصل والطعوم، والتأقلم بعد التطعيم، وبالتالي يُقدم تداعيات أوسع على الممارسات الزراعية المستدامة والجدوى التجارية.
تناولت الدراسة اختيار مصدر الأصول من أصناف الزيتون: حُصد ثمار صنفي الزيتون كروناكي وكوراتينا عندما بدأ لونهما يتغير من الأخضر المصفر إلى البنفسجي.وفقًا لسوتومايور-ليون وكاباليرو (1990)، أُزيل لب الثمرة لاستخراج البذور.
اختيار وتحضير أصول الشتلة: اختيرت شتلات سليمة، بعمر يتراوح بين 4 و6 أسابيع تقريبًا، ذات نظام جذري متطور وقطر ساق يتراوح بين 1 و2 مم، لتكون أصولًا.
أُعطيت الأولوية لتجانس الحجم والقوة لضمان توافقها مع التطعيمات.
قُلّمت الأصول إلى ارتفاع يتراوح بين 2 و3 سم فوق مستوى الوسط، مع ترك قطع رأسي نظيف في الأعلى استعدادًا للتطعيم.
حفظ الأصول المُجهزة في أوعية زراعتها حتى عملية التطعيم للحفاظ على عقمها وترطيبها.
تحضير الطعوم: قُصِّصت الطعوم بطول يتراوح بين 1.5 و2 سم تقريبًا، وأُخذت قمة الفرع وطرفه من الفروع الجانبية حديثة الظهور على الأغصان في مارس. مع التأكد من إجراء قطع قطري نظيف عند الطرف القاعدي لتسهيل عملية التطعيم.
حُفظت الطعوم المُجهزة في أطباق بتري معقمة مُبللة بورق ترشيح معقم حتى الاستخدام لمنع جفافها.
إجراء تجارب التطعيم وصيانة الطعوم المجهرية المختبرية (IVM).
تضمنت عملية التطعيم المجهري تثبيت تطعيمات مجهرية بالشتلات التي أُنبتت مختبريًا.
تكوّن الأصل من شتلات عمرها أسبوعان زُرعت في ظروف المختبر.
بعد قطع رؤوس الشتلات، أُجري شق رأسي بطول 2 مم في أعلى كل أصل. حُضّرت التطعيمات المجهرية بقطع البراعم المجهرية إلى أطوال تتراوح بين 1.5 و2.0 سم، مع تشكيل الطرف السفلي على شكل إسفين ("V").
أُجري هذا التطعيم في بيئة معقمة. وبعد التطعيم، وُضعت الشتلات المطعمة مجهريًا في وسط MS وOM يحتوي على 1.0 ملغم/لتر من BAP وIBA، بينما أُبقيت مجموعة الضبط بدون أي منظمات نمو نباتية (PGRs).
تقيم هذه الدراسة نجاح التطعيم المجهري لصنف كالاماتا (Olea europaea L) على أصلين، كروناكي وكوراتينا، مع فحص تأثير العوامل المختلفة على نتائج التطعيم المجهري. بالإضافة إلى ذلك، يبحث البحث في تأثير التركيب المعدني في وسط المغذيات على نمو هذه الأصول في المختبر.
تنائج البحث
- اوضحت النتائج أن النمط الجيني ووسط النمو يؤثران بشكل كبير على أداء الإنبات، حيث أظهر كروناكي معدل إنبات أعلى (74٪) مقارنة بكوراتينا (62.5٪).
- تفوق وسط موراشيج وسكوج (MS) على وسط الزيتون (OM) من حيث معدلات البقاء واستطالة البراعم.
- على وجه التحديد، سهّل وسط MS نمو البراعم بشكل أكبر (4.85 سم في المتوسط) مقارنة بوسط OM (4.2 سم).
- أظهر كروناكي أطوال براعم متفوقة (5.20 سم على MS و 4.8 سم على OM) مقارنة بكوراتينا (4.5 سم على MS و 3.6 سم على OM).
- خلال عملية التأقلم، أظهرت كروناكي أيضًا معدلات بقاء أعلى (72.5٪) مقارنة بكوراتينا (59٪).
- أشار تحليل الدقة الجينية باستخدام علامات تكرار التسلسل البسيط (ISSR) إلى مستوى عالٍ من الاستقرار الجيني، مع ملاحظة 96٪ من النطاقات أحادية الشكل و 4٪ فقط من تعدد الأشكال.
- تسلط هذه النتائج الضوء على الدور الحاسم للنمط الجيني ووسط النمو في تحسين نجاح التطعيم الدقيق والحفاظ على السلامة الجينية في إكثار أصول الزيتون.
د.حسام